督脈位於人體的中軸線，二十八穴，在背後中脊，總制諸陽，故謂之“督”，是「奇經八脈」的主脈，與六陽經有聯繫，是“陽脈之海”。督脈的起點始於尾閭骨端之長強穴，分別經過男、女的生殖器（會陰），沿著脊骨，腰俞、陽關入命門，上行懸樞、脊中、至中樞，筋縮、至陽歸靈台，神道、身柱、陶道開，大椎、啞門連風府，腦戶、強間、后頂排，百會、前頂通囟會，上星、神庭、素對，水溝、兌端在唇上，齦交上齒肉縫間。督脈與腦、髓、骨息息相關，所謂“腎主骨生髓”、“腎藏精，精生髓，髓養骨”、“腦為髓之海”。任脈與督脈必相交，下交於會陰之間，上則交於唇。
《督脈循行歌》：“督脈小腹骨中央，女子入系溺孔疆。男子之絡循陰器，繞篡之後別臀方。至少陰者循腹裡，會任直上關元行。屬腎會沖街腹氣，入喉上頤環肩當。上繫兩目中央下，始合內眥絡太陽。一額交顛入絡腦，還出下項肩膊場。夾脊抵腰入循膂，絡腎莖篡等同鄉。此是申明督脈路，總為陽脈之督綱。”
《督脈分寸歌》述督脈的穴位：“尾閭骨端是長強，二十一椎腰俞當。十六陽關十四命，三一懸樞脊中央。十椎中樞筋縮九，七椎之下乃至陽。六靈五身三身柱，陶道一椎之下鄉。一椎之上大椎穴，上至髮際啞門行。風府一寸宛中取，腦戶二五枕之方。再上四寸強間位，五寸五分後項強。七寸百會頂中取，耳尖前後髮中央。前頂前項八寸半，前行一尺鹵會量。一尺一寸上星位，前髮尺二神庭當。鼻端準頭素骨翏穴，水溝鼻下人中藏。兌端唇上端上取，齦交唇內齒縫鄉。”
